El tampón de citrato de sodio se usa con frecuencia para el aislamiento de ARN, ya que minimiza la hidrólisis básica de las cadenas de ARN, lo que lo hace invaluable para la purificación de ARNm durante genómico investigación y para estudiar transcripción. Los tampones a base de citrato también ayudan a la detección de antígenos en preparaciones de tejidos fijos, porque rompen los enlaces cruzados formados entre los antígenos y los medios de fijación.
Con los siguientes pasos sencillos, se puede crear un tampón de citrato de sodio con un pH de 6 (ácido) en menos de 10 minutos.
Materiales para el tampón de citrato de sodio
Se requieren pocos materiales para hacer el tampón de citrato de sodio. Con ácido cítrico, uno solo necesita 1 M de hidróxido de sodio, agua destilada y una sonda de pH calibrada. El citrato de sodio es opcional.
La preparación del tampón también requiere un cilindro graduado de 1 litro, un matraz volumétrico de 1 litro y tres botellas de medio de 1 litro. Finalmente, necesitará una barra de agitación magnética y un agitador magnético. Todos estos materiales se pueden encontrar en la escuela,
laboratorios de trabajo o ser comprado en línea o en tiendas especializadas.Dos opciones para hacer el búfer
Hay dos métodos para hacer tampones de citrato de sodio, dependiendo de los materiales accesibles para usted.
- Si tiene tanto ácido cítrico como la base conjugada, cree una solución madre de cada uno mezclando 21 gramos de ácido cítrico en 1 litro de agua destilada y 29,4 gramos de citrato de sodio en 1 litro de agua destilada agua.
- Si solo tiene ácido cítrico a mano, mezcle 2.1 gramos en poco menos de 1 litro de agua destilada.
Mezcla de soluciones de ácido cítrico y citrato de sodio
Mezcle 82 mililitros de la solución de ácido cítrico con 18 mililitros de la solución de citrato de sodio. Para esto, agregue suficiente agua destilada para llevar el volumen de la mezcla a un poco menos de 1 litro.
Ajuste del pH
Mientras agita suavemente la solución con un agitador magnético, use hidróxido de sodio 1 M para ajustar el pH de la mezcla a 6.0. Luego, con un matraz volumétrico, agregue más agua destilada para llevar el volumen total final de la solución a exactamente 1 litro.